Kommissionens andra direktiv 71/393/EEG av den 18 november 1971 om gemenskapsmetoder för analys vid den officiella foderkontrollen

Avis juridique important

Kommissionens andra direktiv 71/393/EEG av den 18 november 1971 om gemenskapsmetoder för analys vid den officiella foderkontrollen Europeiska gemenskapernas officiella tidning nr L 279 , 20/12/1971 s. 0007 - 0018 Finsk specialutgåva Område 3 Volym 4 s. 0049 Dansk specialutgåva: Serie I Område 1971(III) s. 0858 Svensk specialutgåva Område 3 Volym 4 s. 0049 Engelsk specialutgåva: Serie I Område 1971(III) s. 0987 "Grekisk specialutgåva " Område 03 Volym 7 s. 0084 Spansk specialutgåva: Område 03 Volym 5 s. 0117 Portugisisk specialutgåva: Område 03 Volym 5 s. 0117

KOMMISSIONENS ANDRA DIREKTIV av den 18 november 1971 om gemenskapsmetoder fûÑr analys vid den officiella foderkontrollen (71/393/EEG)

EUROPEISKA GEMENSKAPERNAS KOMMISSION HAR ANTAGIT DETTA DIREKTIV

med beaktande av FûÑrdraget om upprûÊttandet av Europeiska ekonomiska gemenskapen,

med beaktande av rûËdets direktiv av den 20 juli 1970(1) om infûÑrande av gemenskapsmetoder fûÑr provtagning och analys vid den officiella foderkontrollen, sûÊrskilt artikel 2 i detta, och

med beaktande av fûÑljande:

I det ovan nûÊmnda direktivet krûÊvs att den officiella foderkontrollen skall ske med gemenskapsmetoder fûÑr provtagning och analys i syfte att kontrollera att fodret uppfyller de krav pûË kvalitet och sammansûÊttning som fastlagts i bestûÊmmelser i lagar och andra fûÑrfattningar.

I kommissionens direktiv 71/250/EEG av den 15 juni 1971(2) har redan ett antal gemenskapsmetoder fûÑr analys faststûÊllts. Det arbete som dûÊrefter utfûÑrts motiverar att en andra sammanstûÊllning av metoder nu antas.

De ûËtgûÊrder som beslutas om i detta direktiv ûÊr fûÑrenliga med StûÊndiga foderkommittûˋns yttrande.

Hû„RIGENOM Fû–RESKRIVS Fû–LJANDE.

Artikel 1

Medlemsstaterna skall krûÊva att analyser vid den officiella foderkontrollen i frûËga om vattenhalt, flyktiga kvûÊvefûÑreningar, total fosfor, rûËoljor och rûËfetter utfûÑrs med de metoder som beskrivs i bilagan till detta direktiv.

De allmûÊnna bestûÊmmelser som ûËterfinns i del 1 (Inledning) av bilagan till kommissionens fûÑrsta direktiv 71/250/EEG av den 15 juni 1971 om gemenskapsmetoder fûÑr analys vid den officiella foderkontrollen skall tillûÊmpas pûË de metoder som beskrivs i bilagan till det hûÊr direktivet.

Artikel 2

Medlemsstaterna skall sûÊtta i kraft de lagar och andra fûÑrfattningar som ûÊr nûÑdvûÊndiga fûÑr att fûÑlja detta direktiv senast den 1 januari 1973. De skall genast underrûÊtta kommissionen om detta.

Artikel 3

Detta direktiv riktar sig till medlemsstaterna.

UtfûÊrdat i Bryssel den 18 november 1971.

PûË kommissionens vûÊgnar

Franco M. MALFATTI

OrdfûÑrande

(1) EGT nr L 170, 3.8.1970, s. 2.

(2) EGT nr L 155, 12.7.1971, s. 13.

BILAGA

I. BESTû„MNING AV VATTENHALT

1. Syfte och rûÊckvidd

Med denna metod kan vattenhalten i foder bestûÊmmas. Den kan inte tillûÊmpas vid analys av mjûÑlkprodukter som anvûÊnds som oblandat foder, analys av mineralûÊmnen och blandningar som till stûÑrre delen bestûËr av mineralûÊmnen eller analys av oljehaltiga frûÑn och frukter enligt definitionen i rûËdets fûÑrordning nr 136/66/EEG(1) av den 22 september 1966 om den gemensamma organisationen av marknaden fûÑr oljor och fetter.

BestûÊmning av vattenhalten i oljehaltiga frûÑn och frukter beskrivs i bilaga 3 till kommissionens fûÑrordning (EEG) nr 1470/68(2) av den 23 september 1968 om provtagning och reduktion av prover och om bestûÊmning av oljehalt, fûÑroreningar och fukt i oljefrûÑer.

2. Princip

Provet torkas pûË det sûÊtt som anges fûÑr det aktuella foderslaget. MassafûÑrlusten bestûÊms genom vûÊgning. DûË det gûÊller fast foder med hûÑg vattenhalt ûÊr det nûÑdvûÊndigt att utfûÑra en fûÑrberedande torkning.

3. Utrustning

3.1 Kross av ej vattenabsorberande material som skall vara lûÊtt att rengûÑra, tillûËta snabb och jûÊmn krossning utan nûÊmnvûÊrd vûÊrmeutveckling, sûË lûËngt mûÑjligt fûÑrhindra kontakt med omgivande luft och motsvara de krav som anges i 4.1.1 och 4.1.2 (t.ex. mikrokrossar med hammare eller vattenkylning, utfûÊllbara trattkvarnar, lûËghastighets- eller kugghjulskrossar).

3.2 AnalysvûËg med en noggrannhet av 0,5 mg.

3.3 Torra behûËllare av metall som inte frûÊts eller av glas och med lock som medger lufttûÊt fûÑrslutning. Arbetsytan skall gûÑra det mûÑjligt att sprida ut provet med cirka 0,3 g/cm2.

3.4 Elektrisk isotermisk ugn (ôÝ 1 ô¯C) med tillfredsstûÊllande ventilation och mûÑjlighet till snabb temperaturûÊndring(3).

3.5 Reglerbar elektrisk vakuumugn med oljepump och antingen en mekanism fûÑr tillfûÑrsel av varm, torkad luft eller ett torkmedel (t.ex. kalciumoxid).

3.6 Exsickator med tjock perforerad metall- eller porslinsplatta och med ett effektivt torkmedel.

4. UtfûÑrande

OBS! De operationer som beskrivs i detta avsnitt mûËste utfûÑras omedelbart efter det att provfûÑrpackningarna ûÑppnats. Minst tvûË parallella analyser mûËste utfûÑras.

4.1 Preparering

4.1.1 Andra foder ûÊn sûËdana som behandlas i 4.1.2 och 4.1.3

Ta minst 50 g av provet. Krossa eller sûÑnderdela, om detta ûÊr nûÑdvûÊndigt, sûË att varje skillnad i vattenhalt undviks (se 6).

4.1.2 SpannmûËl och grûÑpe

Ta minst 50 g av provet. Mal till partiklar som till minst 50 % passerar genom en sikt med en maskvidd av 0,5 mm och som lûÊmnar hûÑgst 10 % ûËterstod pûË en rundmaskig sikt med en maskvidd av 1 mm.

4.1.3 Foder i flytande form eller pastaform samt foder som till stûÑrre delen bestûËr av oljor och fetter

Ta cirka 25 g av provet, vûÊg upp med en noggrannhet av 10 mg, tillsûÊtt lûÊmplig mûÊngd vattenfri sand som vûÊgts med en noggrannhet av 10 mg och blanda tills en homogen massa erhûËlls.

4.2 Torkning

4.2.1 Andra foder ûÊn sûËdana som behandlas i 4.2.2 och 4.2.3

VûÊg en behûËllare (3.3) med lock med en noggrannhet av 0,5 mg. VûÊg upp cirka 5 g av provet med en noggrannhet av 1 mg i den vûÊgda behûËllaren och fûÑrdela det jûÊmnt. Placera behûËllaren utan lock i ugnen som fûÑrvûÊrmts till 103 ô¯C. SûÊtt in behûËllaren i ugnen sûË snabbt som mûÑjligt sûË att ugnstemperaturen inte sjunker alltfûÑr mycket. LûËt torka under fyra timmar rûÊknat frûËn det att ugnstemperaturen ûËter stigit till 103 ô¯C. SûÊtt pûË nytt locket pûË behûËllaren, ta ut denna ur ugnen, lûËt svalna under 30 45 minuter i exsickatorn (3.6) och vûÊg med en noggrannhet av 1 mg.

Foder som till stûÑrre delen bestûËr av oljor och fetter skall torka i ugnen under ytterligare 30 minuter vid 103 ô¯C. Skillnaden i vattenhalt mellan de bûËda vûÊgningarna fûËr inte ûÑverstiga 0,1 %.

4.2.2 SpannmûËl, mjûÑl och grûÑpe

VûÊg en behûËllare (3.3) med lock med en noggrannhet av 0,5 mg. VûÊg upp cirka 5 g av det krossade provet med en noggrannhet av 1 mg i den vûÊgda behûËllaren och fûÑrdela det jûÊmnt. Placera behûËllaren utan lock i ugnen som fûÑrvûÊrmts till 130 ô¯C. SûÊtt in behûËllaren i ugnen sûË snabbt som mûÑjligt sûË att ugnstemperaturen inte sjunker alltfûÑr mycket. LûËt torka under tvûË timmar rûÊknat frûËn det att ugnstemperaturen ûËter stigit till 130 ô¯C. SûÊtt pûË nytt locket pûË behûËllaren, ta ut denna ur ugnen, lûËt svalna under 30 45 minuter i exsickatorn (3.6) och vûÊg med en noggrannhet av 1 mg.

4.2.3 Foderblandningar som innehûËller mer ûÊn 4 % sackaros eller laktos; oblandade foder som t.ex. johannesbrûÑdsfrûÑn, hydrolyserade spannmûËlsprodukter, torkad betsnitsel, fiskavrens och melass; foderblandningar som innehûËller mer ûÊn 25 % mineralsalter inklusive kristallvatten

VûÊg en behûËllare (3.3) med lock med en noggrannhet av 0,5 mg. VûÊg upp cirka 5 g av provet med en noggrannhet av 1 mg i den vûÊgda behûËllaren och fûÑrdela det jûÊmnt. Placera behûËllaren utan lock i vakuumugnen (3.5) som fûÑrvûÊrmts till mellan 80 och 85 ô¯C. SûÊtt in behûËllaren i ugnen sûË snabbt som mûÑjligt sûË att ugnstemperaturen inte sjunker alltfûÑr mycket.

StûÊll in trycket pûË 100 torr och lûËt torka vid detta tryck under fyra timmar, antingen med en torr varmluftsstrûÑm eller med hjûÊlp av torkmedel (cirka 300 g till 20 prov). Om det senare alternativet vûÊljs skall vakuumpumpen frûËnkopplas nûÊr det fûÑreskrivna trycket har uppnûËtts. RûÊkna torkningstiden frûËn det att ugnstemperaturen ûËter har uppnûËtt 80 85 ô¯C. û terstûÊll fûÑrsiktigt det atmosfûÊriska trycket i ugnen. û–ppna ugnen, sûÊtt omedelbart lock pûË behûËllaren, ta ut den ur ugnen, lûËt svalna under 30 45 minuter i exsickatorn (3.6) och vûÊg med en noggrannhet av 1 mg. LûËt torka ytterligare 30 minuter i vakuumugnen vid 80 85 ô¯C och vûÊg pûË nytt. Skillnaden i vattenhalt mellan de bûËda vûÊgningarna fûËr inte ûÑverstiga 0,1 %.

4.3 FûÑrberedande torkning

4.3.1 Andra foder ûÊn sûËdana som behandlas i 4.3.2

Fasta foder med hûÑg vattenhalt som fûÑrsvûËrar krossning mûËste ges en fûÑrberedande torkning pûË fûÑljande sûÊtt:

VûÊg upp 50 g okrossat prov med en noggrannhet av 10 mg (pellets och briketter kan delas grovt om sûË ûÊr nûÑdvûÊndigt) i en lûÊmplig behûËllare (t.ex. en 20 x 12 cm aluminiumplûËt med 0,5 cm upphûÑjd kant). LûËt torka i ugn vid 60 70 ô¯C tills vattenhalten har reducerats till mellan 8 och 12 %. Ta ut provet ur ugnen, lûËt svalna utan lock i laboratoriet under en timme och vûÊg med en noggrannhet av 10 mg. Krossa provet omedelbart enligt 4.1.1 och torka enligt 4.2.1 eller 4.2.3 beroende pûË fodrets art.

4.3.2 SpannmûËl

Korn med en vattenhalt pûË ûÑver 17 % mûËste ges en fûÑrberedande torkning pûË fûÑljande sûÊtt:

VûÊg upp 50 g omalda korn med en noggrannhet av 10 mg i en lûÊmplig behûËllare (t.ex. en 20 x 12 cm aluminiumplûËt med 0,5 cm upphûÑjd kant). LûËt torka i ugn under 5 7 minuter vid 130 ô¯C. Ta ut provet ur ugnen, lûËt svalna utan lock i laboratoriet under tvûË timmar och vûÊg med en noggrannhet av 10 mg. Mal omedelbart enligt 4.1.2 och torka enligt 4.2.2.

5. ResultatberûÊkning

Vattenhalten i procent av provet berûÊknas med fûÑljande formler:

5.1 Torkning utan fûÑrberedande torkning

(E m) 7 >NUM>100

>DEN>E

dûÊr:

E = provets ursprungliga massa i gram.

m = det torkade provets massa i gram.

5.2 Torkning med fûÑrberedande torkning

[>NUM>(M' m) M >DEN>M' + E M] 7 >NUM>100 >DEN>E = 100(1 - >NUM>Mm >DEN>EM')

dûÊr: E = provets ursprungliga massa i gram.

M = provets massa i gram efter fûÑrberedande torkning.

M' = provets massa i gram efter krossning eller malning.

m = det torkade provets massa i gram.

5.3 Repeterbarhet

Skillnaden i vattenhalt mellan resultaten av tvûË bestûÊmningar som utfûÑrs parallellt pûË samma prov fûËr inte ûÑverstiga 0,2 %.

6. AnmûÊrkning

Om det visar sig nûÑdvûÊndigt att krossa provet och detta medfûÑr en iakttagbar fûÑrûÊndring av vattenhalten, mûËste resultaten av analyserna av bestûËndsdelarna i fodret korrigeras pûË grundval av provets vattenhalt i ursprungligt skick.

II. BESTû„MNING AV FLYKTIGA KVû„VEFû–RENINGAR

A. MIKRODIFFUSION

1. Syfte och rûÊckvidd

Med denna metod kan halten flyktiga kvûÊvefûÑreningar, uttryckt som ammoniak, bestûÊmmas i foder.

2. Princip

Provet extraheras med vatten och lûÑsningen klargûÑrs och filtreras. De flyktiga kvûÊvefûÑreningarna fûÑrflyttas genom mikrodiffusion med kaliumkarbonatlûÑsning, insamlas i borsyrelûÑsning och titreras med svavelsyra.

3. Reagens

3.1 20-procentig triklorûÊttiksyrelûÑsning (vikt/volym).

3.2 Indikator: lûÑs 33 mg bromkresolgrûÑnt och 65 mg metylrûÑtt i 100 ml 95 96-procentig etanol (volym/volym).

3.3 BorsyrelûÑsning: lûÑs 10 g borsyra pa i en enliters mûÊtkolv med 200 ml 95 96-procentig etanol (volym/volym) och 700 ml vatten. TillsûÊtt 10 ml indikator (3.2). Blanda och ûÊndra, om sûË ûÊr nûÑdvûÊndigt, lûÑsningens fûÊrg till ljusrûÑtt genom att tillsûÊtta natriumhydroxidlûÑsning. 1 ml av denna lûÑsning fixerar maximalt 300 ôçg NH3.

3.4 MûÊttad kaliumkarbonatlûÑsning: lûÑs 100 g kaliumkarbonat pa i 100 ml kokande vatten. LûËt svalna och filtrera.

3.5 Svavelsyra 0,02 N.

4. Utrustning

4.1 Blandare (tumlare): cirka 35 40 varv i minuten.

4.2 Conwayceller av glas eller plast (se diagram).

4.3 Mikrobyretter graderade i 1/100 ml.

5. UtfûÑrande

VûÊg upp 10 g av provet med en noggrannhet av 1 mg och ûÑverfûÑr det tillsammans med 100 ml vatten till en 200 ml mûÊtkolv. Blanda i tumlaren under 30 minuter. TillsûÊtt 50 ml triklorûÊttiksyrelûÑsning (3.1), fyll pûË vatten till full volym, skaka om kraftigt och filtrera genom ett korrugerat filter.

Fyll med pipett 1 ml borsyrelûÑsning (3.3) i den centrala delen av Conwaycellen och 1 ml av provfiltratet i cellens krona. TûÊck delvis med det infettade locket. Droppa snabbt 1 ml mûÊttad kaliumkarbonatlûÑsning (3.4) i kronan och tillslut locket lufttûÊtt. Vrid cellen med fûÑrsiktig horisontell rotation sûË att de tvûË reagensen blandas. LûËt inkubera antingen vid rumstemperatur under minst fyra timmar eller vid 40 ô¯C under en timme.

Titrera med hjûÊlp av en mikrobyrett (4.3) de flyktiga baserna i borsyrelûÑsningen med svavelsyra 0,02 N (3.5).

UtfûÑr ett blankprov med samma metod men med uteslutande av analysprovet.

6. ResultatberûÊkning

1 ml H2SO4 0,02 N motsvarar 0,34 mg ammoniak.

Uttryck resultatet i procent av provet.

Repeterbarhet

Skillnaden mellan tvûË parallella bestûÊmningar som utfûÑrs pûË samma prov fûËr inte ûÑverstiga

10 % i relativvûÊrde fûÑr ammoniakhalter under 1,0 %,

0,1 % i absolutvûÊrde fûÑr ammoniakhalter pûË 1,0 % eller hûÑgre.

7. AnmûÊrkning

Om provets ammoniakhalt ûÑverstiger 0,6 % skall det ursprungliga filtratet spûÊdas ut.

>HûÊnvisning till film>

B. GENOM DESTILLATION

1. Syfte och rûÊckvidd

Med denna metod kan halten flyktiga kvûÊvefûÑreningar, uttryckt som ammoniak, bestûÊmmas i fiskmjûÑl som ûÊr i det nûÊrmaste ureafritt. Den kan endast anvûÊndas vid ammoniakhalter under 0,25 %.

2. Princip

Provet extraheras med vatten och lûÑsningen klargûÑrs och filtreras. De flyktiga kvûÊvefûÑreningarna frigûÑrs vid kokpunkten genom tillsats av magnesiumoxid och samlas in i en bestûÊmd mûÊngd svavelsyra. û–verskottet svavelsyra ûËtertitreras med natriumhydroxidlûÑsning.

3. Reagens

3.1 20-procentig triklorûÊttiksyrelûÑsning (vikt/volym).

3.2 Magnesiumoxid pa.

3.3 SkumhûÊmmande emulsion (t.ex. silikon).

3.4 Svavelsyra 0,1 N.

3.5 NatriumhydroxidlûÑsning 0,1 N.

3.6 0,3-procentig metylrûÑttlûÑsning (vikt/volym) i 95 96-procentig etanol (volym/volym).

4. Utrustning

4.1 Blandare (tumlare): cirka 35 40 varv i minuten.

4.2 Destillationsapparat av Kjeldahlstyp.

5. UtfûÑrande

VûÊg upp 10 g av provet med en noggrannhet av 1 mg och placera det tillsammans med 100 ml vatten i en 200 ml mûÊtkolv. Blanda i tumlaren under 30 minuter. TillsûÊtt 50 ml triklorûÊttiksyrelûÑsning (3.1), fyll pûË vatten till full volym, skaka om kraftigt och filtrera genom ett korrugerat filter.

Ta en mûÊngd klart filtrat som ûÊr lûÊmplig fûÑr den antagna halten flyktiga kvûÊvefûÑreningar (100 ml ûÊr vanligen lûÊmpligt). SpûÊd till 200 ml och tillsûÊtt 2 g magnesiumoxid (3.2) och nûËgra droppar skumhûÊmmande emulsion (3.3). LûÑsningen skall ge basisk reaktion pûË lackmuspapper; om sûË inte ûÊr fallet tillsûÊtts nûËgot magnesiumoxid (3.2). Destillera cirka 150 ml av lûÑsningen i Kjeldahlsapparaten och ûÑverfûÑr destillatet till en Erlenmayerkolv som innehûËller en noggrant uppmûÊtt volym (25 50 ml) svavelsyra 0,1 N (3.4). Undvik att sidorna blir ûÑverhettade under destillationen. Koka svavelsyrelûÑsningen under tvûË minuter, kyl den och ûËtertitrera ûÑverskottet svavelsyra med natriumhydroxidlûÑsningen 0,1 N (3.5) och tillsammans med metylrûÑttindikatorn (3.6).

UtfûÑr ett blankprov med samma metod men med uteslutande av analysprovet.

6. ResultatberûÊkning 1 ml H2SO4 0,1 N motsvarar 1,7 mg ammoniak.

Uttryck resultatet i procent av provet.

Repeterbarhet

Skillnaden mellan resultaten av tvûË parallella bestûÊmningar som utfûÑrs pûË samma prov fûËr inte ûÑverstiga 10 % ammoniak (relativvûÊrde).

III. BESTû„MNING AV TOTAL FOSFOR

Fotometrisk metod

1. Syfte och rûÊckvidd

Med denna metod kan halten total fosfor bestûÊmmas i foder. Metoden ûÊr sûÊrskilt lûÊmplig fûÑr analys av produkter med lûËg fosforhalt. I vissa fall (fosforrika produkter) kan en gravimetrisk metod anvûÊndas.

2. Princip

Provet mineraliseras antingen genom torrfûÑrbrûÊnning (i frûËga om organiska foder) eller genom fûÑrbrûÊnning med syra (i frûËga om mineralfûÑreningar och flytande foder) och lûÊggs i en syralûÑsning. LûÑsningen behandlas med molybdovanadatreagens. Den optiska densiteten hos den gula lûÑsning som dûË bildas mûÊts i spektrofotometer vid 430 nm.

3. Reagens

3.1 Kalciumkarbonat pa.

3.2 Saltsyra pa, d: 1,1 (cirka 6 N).

3.3 Salpetersyra pa, d: 1,045.

3.4 Salpetersyra pa, d: 1,38 1,42.

3.5 Svavelsyra pa, d: 1,84.

3.6 Molybdovanadatreagens: blanda 200 ml ammoniumheptamolybdatlûÑsning (3.6.1), 200 ml ammoniumvanadatlûÑsning (3.6.2) och 134 ml salpetersyra (3.4) i en enliters mûÊtkolv. Fyll pûË vatten till full volym.

3.6.1 AmmoniumheptamolybdatlûÑsning: lûÑs upp 100 g ammoniumheptamolybdat pa, (NH4)6 Mo-O24.4 H2O, i varmvatten. TillsûÊtt 10 ml ammoniak (d: 0,91) och fyll pûË vatten till en liter.

3.6.2 AmmoniumvanadatlûÑsning: lûÑs upp 2,35 g ammoniumvanadat pa, NH4VO3, i 400 ml varmvatten. TillsûÊtt lûËngsamt under stûÊndig omrûÑrning 20 ml utspûÊdd salpetersyra (7 ml HNO3 (3.4) + 13 ml H2O) och fyll pûË vatten till en liter.

3.7 StandardfosforlûÑsning 1 mg/ml: lûÑs upp 4,387 g kaliumdivûÊtefosfat pa KH2PO4 i vatten. Fyll pûË vatten till en liter.

4. Utrustning

4.1 FûÑraskningsdeglar av kisel eller porslin.

4.2 Elektrisk muffelugn med termostaten instûÊlld pûË 550 ô¯C.

4.3 250 ml Kjeldahlskolv.

4.4 MûÊtkolvar och precisionspipetter.

4.5 Spektrofotometer.

4.6 ProvrûÑr, cirka 16 mm i diameter, med proppar, 14,5 mm i diameter; rymd: 25 30 ml.

5. UtfûÑrande

5.1 Beredning av lûÑsningen

LûÑsningen bereds enligt 5.1.1 eller 5.1.2 beroende pûË provets art.

5.1.1 Vanlig metod

VûÊg upp 1 g eller mer av provet med en noggrannhet av 1 mg. LûÊgg provet i en Kjeldahlskolv, tillsûÊtt 20 ml svavelsyra (3.5), skaka om sûË att substansen helt impregneras med syra och sûË att den inte fastnar vid kolvens vûÊggar, upphetta och behûËll vid kokpunkten under 10 minuter. LûËt svalna nûËgot, tillsûÊtt 2 ml salpetersyra (3.4), upphetta fûÑrsiktigt, lûËt svalna nûËgot, tillsûÊtt litet mer salpetersyra (3.4) och upphetta ûËter till kokpunkten. Upprepa detta fûÑrfarande tills en fûÊrglûÑs lûÑsning erhûËlls. Kyl, tillsûÊtt litet vatten och hûÊll ûÑver vûÊtskan i en 500 ml mûÊtkolv varvid Kjeldahlskolven skûÑljs med varmvatten. LûËt svalna, fyll pûË vatten till full volym, homogenisera och filtrera.

5.1.2 Prov som innehûËller organiska ûÊmnen och som ûÊr fria frûËn kalcium- och magnesiumdivûÊtefosfat

VûÊg upp cirka 2,5 g av provet i en fûÑraskningsdegel med en noggrannhet av 1 mg. Blanda provet fullstûÊndigt med 1 g kalciumkarbonat (3.1). FûÑraska i ugnen vid 550 ô¯C ôÝ 5 ô¯C tills en vit eller grûË aska erhûËlls (visst inslag av trûÊkol har ingen betydelse).

Flytta askan till en 250 ml bûÊgare. TillsûÊtt 20 ml vatten och saltsyra (3.2) tills skumningen upphûÑr. TillsûÊtt ytterligare 10 ml saltsyra (3.2). Placera bûÊgaren i sandbad och indunsta fullstûÊndigt sûË att kiseln blir olûÑslig. LûÑs ûËter upp ûËterstoden i 10 ml salpetersyra (3.3) och koka pûË sandbadet under fem minuter utan fullstûÊndig indunstning. HûÊll ûÑver vûÊtskan i en 500 ml mûÊtkolv genom att upprepade gûËnger skûÑlja bûÊgaren med varmvatten. LûËt svalna, fyll pûË vatten till full volym, homogenisera och filtrera.

5.2 FûÊrgutveckling och mûÊtning av optisk tûÊthet

SpûÊd ut en del av det filtrat som erhûËllits enligt 5.1.1 eller 5.1.2 sûË att en fosforhalt av hûÑgst 40 ôçg/ml erhûËlls. HûÊll 10 ml av denna lûÑsning i ett provrûÑr (4.6) och tillsûÊtt 10 ml molybdovanadatreagens (3.6). Homogenisera och lûËt stûË i minst 10 minuter vid 20 ô¯C. MûÊt den optiska tûÊtheten i spektrofotometer vid 430 mm mot en lûÑsning av 10 ml molybdovanadatreagens (3.6) i 10 ml vatten.

5.3 Kalibreringskurva

Av standardlûÑsningen (3.7) bereds lûÑsningar som innehûËller 5, 10, 20, 30 respektive 40 ôçg fosfor per ml. Ta 10 ml av var och en av dessa lûÑsningar och tillsûÊtt 10 ml molybdovanadatreagens (3.6). Homogenisera och lûËt stûË i minst 10 minuter vid 20 ô¯C. MûÊt den optiska tûÊtheten enligt anvisningarna i 5.2.

Rita kalibreringskurvan genom att markera de optiska tûÊtheterna vid motsvarande kvantitet fosfor. Vid koncentrationer mellan 0 och 40 ôçg/ml ûÊr kurvan lineûÊr.

6. ResultatberûÊkning

BestûÊm mûÊngden fosfor i provet med hjûÊlp av kalibreringskurvan.

Uttryck resultatet i procent av provet.

Repeterbarhet

Skillnaden mellan resultaten av tvûË parallella bestûÊmningar som utfûÑrs pûË samma prov fûËr inte ûÑverstiga

3 % (relativvûÊrde) vid fosforhalter under 5 %,

0,15 % (absolutvûÊrde) vid fosforhalter pûË 5 % eller mer.

IV. BESTû„MNING AV Rû OLJOR OCH Rû FETTER

1. Syfte och rûÊckvidd

Med denna metod kan halten rûËoljor och rûËfetter bestûÊmmas i foder. Metoden tûÊcker inte den analys av oljehaltiga frûÑn och frukter som definieras i rûËdets fûÑrordning 136/66/EEG av den 22 september 1966. BestûÊmningen av oljehalten i sûËdana produkter beskrivs i bilaga 5 till kommissionens fûÑrordning (EEG) nr 1470/68 av den 23 september 1968.

Beroende pûË fodrets art anvûÊnds en av fûÑljande tvûË metoder:

1.1 Metod A (extraktion med eter): tillûÊmpas pûË alla foder utom sûËdana som nûÊmns i 1.2.

1.2 Metod B: tillûÊmpas pûË foder vilkas oljor och fetter inte kan extraheras fullstûÊndigt med dietyleter utan fûÑregûËende hydrolys, foder av animaliskt ursprung, gluten, torkat potatismos, torkad bottensats och torkat avfall frûËn bryggerier och destillerier, torkad jûÊst, avfall frûËn kex, brûÑd och fûÊrdiglagad mat, mjûÑlkprodukter och foder som till stor del (minst 40 %) bestûËr av sûËdana produkter samt fettberikade foderblandningar.

2. Princip

2.1 Metod A: Oljorna och fetterna extraheras med dietyleter. LûÑsningsmedlet destilleras och ûËterstoden torkas och vûÊgs.

2.2 Metod B: Det varma provet hydrolyseras med saltsyra. LûÑsningen kyls och filtreras. û terstoden skûÑljs och torkas samt extraheras med dietyleter enligt metod A.

3. Reagens

3.1 Vattenfri dietyleter, d: 0,720, kokpunkt 34,5 ô¯C, i det nûÊrmaste peroxidfri.

3.2 Vattenfritt natriumsulfat pa.

3.3 Saltsyra 3 N.

3.4 Filtermedel, t.ex. kiselgur, Hyflo-supercel.

3.5 Koltetraklorid pa.

4. Utrustning

4.1 Soxhletutrustning eller motsvarande.

4.2 ExplosionssûÊker upphettningsutrustning med temperaturkontroll.

4.3 Vakuumtorkugn (mindre ûÊn 100 torr).

5. UtfûÑrande

5.1 Metod A: (se 7.1)

VûÊg upp 5 g av provet med en noggrannhet av 1 mg och blanda med 2 3 g (eller mer, om sûË ûÊr nûÑdvûÊndigt) vattenfritt natriumsulfat (3.2). LûÊgg blandningen i en extraktionshylsa som ûÊr fri frûËn oljor och fetter och tûÊck med en tuss fettfri bomull. (Blandningen kan utfûÑras i hylsan.)

Placera hylsan i extraktionsutrustningen (4.1) och extrahera med dietyleter (3.1) under sex timmar. Om utrustning av Soxhlettyp anvûÊnds skall vûÊrmen regleras sûË att minst 15 fûÑrûËngningar per timme erhûËlls. Samla eterextraktet i en torr, vûÊgd kolv med pimpstensskûÊrvor(4).

Destillera etern och torka ûËterstoden efter fûÑrûËngningen under en och en halv timme i vakuumtorkugnen (4.3) vid 75 ô¯C. Kyl i en exsickator och vûÊg. Torka ûËterigen under 30 minuter fûÑr att kontrollera att oljans och fettets vikt fûÑrblir konstant (viktfûÑrlusten mûËste vara mindre ûÊn 1 mg).

5.2 Metod B:

VûÊg upp 2,5 g av provet med en noggrannhet av 1 mg (se 7.2) och placera det i en 400 ml bûÊgare eller en 300 ml Erlenmayerkolv. TillsûÊtt 100 ml saltsyra 3 N (3.3) och pimpstensskûÊrvor. TûÊck bûÊgaren med ett klockglas eller anslut en ûËterloppskylare till Erlenmayerkolven. Koka upp blandningen lûÊtt ûÑver svag lûËga eller pûË kokplatta och behûËll den dûÊr under en timme. Se till att produkten inte fastnar pûË behûËllarens innervûÊggar.

Kyl och tillsûÊtt sûË mycket filtermedel (3.4) att inte nûËgon olja eller nûËgot fett fûÑrloras under filtreringen. Filtrera genom fuktat, fettfritt, dubbelt filtrerpapper. SkûÑlj ûËterstoden i kallt vatten tills syrareaktionen upphûÑr. Kontrollera att filtratet inte innehûËller olja eller fett. Skulle sûË vara fallet, betyder det att provet mûËste extraheras med dietyleter enligt den metod som anges i 5.1 fûÑre hydrolys.

Placera det dubbla filtrerpapperet som innehûËller ûËterstoden pûË ett klockglas och torka i ugnen vid 95 98 ô¯C under en och en halv timme.

Placera det dubbla filtrerpapperet och den torkade ûËterstoden i en extraktionshylsa, extrahera med dietyleter och fortsûÊtt enligt anvisningarna i 5.1 andra stycket.

6. ResultatberûÊkning

Uttryck resultatet i procent av provet.

Repeterbarhet

Skillnaden mellan tvûË parallella bestûÊmningar som utfûÑrs pûË samma prov fûËr inte ûÑverstiga 0,3 % olja eller fett.

7. AnmûÊrkningar

7.1 Om produkterna har hûÑg olje- och fetthalt och ûÊr svûËra att krossa eller om det inte gûËr att avskilja ett homogent prov fûÑr analys, anvûÊnds fûÑljande metod: VûÊg upp 20 g av provet med en noggrannhet av 1 mg och blanda med 10 g eller mer vattenfritt natriumsulfat (3.2). Extrahera med dietyleter (3.1) enligt anvisningarna i 5.1. TillsûÊtt koltetraklorid (3.5) till det erhûËllna extraktet till en sammanlagd volym av 500 ml och homogenisera. Ta 50 ml av lûÑsningen och hûÊll den i en torr och vûÊgd liten kolv som innehûËller pimpstensskûÊrvor(5). Destillera lûÑsningsmedlet, torka och fortsûÊtt enligt anvisningarna i 5.1 sista stycket. AvlûÊgsna lûÑsningsmedlet frûËn den ûËterstod som finns kvar i hylsan efter extraktionen och krossa detta till 1 mm stora partiklar. Placera ûËter produkten i extraktionshylsan (tillsûÊtt inte natriumsulfat), extrahera med dietyleter och fortsûÊtt enligt anvisningarna i 5.1 andra och tredje stycket.

BerûÊkna resultatet i procent av provet med utnyttjande av den del som anvûÊndes vid den fûÑrsta extraktionen och med fûÑljande formel:

(10 a + b) 7 5

dûÊr

a = eterextrakt i gram av analysprovet efter fûÑrsta extraktionen,

b = eterextrakt i gram efter andra extraktionen.

7.2 Om produkterna har lûËg olje- och fetthalt, kan analysprovet utûÑkas till 5 g.

(1) EGT nr 172, 30.9.1966, s. 3025/66.

(2) EGT nr L 239, 28.9.1968, s. 2.

(3) FûÑr torkning av spannmûËl, mjûÑl och grûÑpe mûËste ugnen ha en sûËdan vûÊrmekapacitet att den, om den fûÑrinstûÊllts pûË 13 ô¯C, ûËtertar denna temperatur pûË mindre ûÊn 45 minuter efter det att ett maximalt antal prov har placerats i den fûÑr samtidig torkning. Ventilationen mûËste vara sûËdan att om sûË mûËnga prov av vanligt vete som ryms i den torkas under tvûË timmar, resultatet skiljer sig med mindre ûÊn 0,15 % frûËn det som erhûËlls efter fyra timmars torkning.

(4) Om oljan eller fettet skall genomgûË dûÊrpûË fûÑljande kvalitetstester ersûÊtts pimpstensskûÊrvorna med glaspûÊrlor.

(5) Om oljan eller fettet skall genomgûË dûÊrpûË fûÑljande kvalitetstester ersûÊtts pimpstensskûÊrvorna med glaspûÊrlor.